.

 

CEEX 23

Denumirea proiectului: Îmbunatatirea calitatii furajului la lucerna prin modificarea arhitecturii plantei cu ajutorul metodelor biotehnologice

Sursa de finantare: Bugetul de Stat – Ministerul Educatiei si Cercetarii, Programul ”Cercetare de excelenta”

Autoritatea contractanta:

Centrul National de Management Programe –Programul Biotech Contractor: Institutul National de Cercetare –Dezvoltare Agricola Fundulea

Categoria de proiect: Modulul 1- Proiecte de Cercetare – Dezvoltare Complexe, tipul de proiect P–CD

Valoarea contractului: 1.222.000 lei - din care:

  • de la buget: 1.070.000 lei
  • cofinantare: 152.000 lei

Durata contractului: 3 ani (oct. 2005 – oct. 2007)

Parteneri

Coordonator proiect: Institutul National de Cercetare – Dezvoltare Agricola – Fundulea, str. N.Titulescu. nr. 1, 915200, Fundulea , tel. +40213154040, fax. +40242642044, E-mail: schitea@ricic.ro, web site: www.incda-fundulea.ro

Director proiect: Dr. Ing. Maria SCHITEA

Partener 2: Institutul de Biologie – Bucuresti Splaiul Independentei, nr. 296, 060042, BUCURESTI, Tel/fax:2239072/221, 2219071, e-mail: ancuta_paun@yahoo.com, www.ibiol.ro Responsabil stiintific: Dr. Biolog Anca PĂUNESCU

Partener 3: Universitatea de Stiinte Agronomice si Medicina Veterinara a Banatului –Timisoara Calea Aradului, nr. 119, cod 1900, Timisoara, tel: +40-(0)256-494023, fax: +40- (0)256–200296, e-mail:elenamarcelabadea@yahoo.com, clasor_ro@yahoo.com, site web: http://www.usab-tm.ro

Responsabil stiintific: Prof.univ.dr. Elena Marcela BADEA

Partener 4: Institutul National de Biologie si Nutritie Animala Balotesti – Sector Cercetare Calea Bucuresti, nr. 1, BALOTESTI, tel/fax +40-(0) 213512084/3512080, e-mail: dihoru.alexandrina@ibna.ro, www.ibna.ro

Responsabil stiintific:Dr. Biolog Alexandrina DIHORU

Partener 5: Institutul National de Biologie si Nutritie Animala Balotesti – Ferma Agrozootehnica Calea Bucuresti, nr. 1, BALOTESTI, tel/fax +40-(0) 213512084/3512080, e-mail: dihoru.alexandrina@ibna.ro, www.ibna.ro

Responsabil stiintific:Ing. Calin ALEXANDRU  

Echipa de cercetare

Dr. Ing. Maria SCHITEA – Director proiect
Dr. Ing. Elena PETCU
Dr. Ing. Florentina RĂDUCANU
Ing. Domnica BADEA
Ing. Valentin EPURE CRISTEA
Ing. Constantin STAN
Ec. Miorita ARION
Dr. Biolog Anca PĂUNESCU – Responsabil Stiintific –partener 2
Prof. Univ. Dr. Biolog Elena Marcela BADEA
Prof. Univ. Dr. Biolog Elena Marcela BADEA - Responsabil Stiintific –partener 3
Sef lucrari Dr. Sorina MIHACEA
Conferentiar Dr. Dorica BOTARU
Ing. Drd. Cerasela DRĂGOESCU
Ing. Drd. Oana BOLDURA
Dr. Biolog Alexandrina DIHORU - Responsabil Stiintific –partener 4
Dr. Ing. Ilie VOICU Dr. Ing. Rodica Diana CRISTE
DR. Ing. Margareta OLTEANU
Ing. Dorica VOICU
Dr. Ing. Catalin DRAGOMIR
Ing. Calin ALEXANDRU - Responsabil Stiintific –partener 5  

Obiectivele proiectului

• transferul markerilor moleculari de la Medicago truncatula la Medicago sativa, germoplasma adaptata la conditiile din România;
• constructia unei harti de linkage la lucerna tetraploida din România;
• identificarea markerilor moleculari linkati cu caractere importante agronomic;
• educarea si formarea unor specialisti care sa utilizeze tehnicile moleculare în procesul ameliorarii.
• amplificarea variabilitătii genetice prin regenerarea plantelor din celule cultivate „in vitro”.  

Lucrări publicate pe baza cercetărilor efectuate în cadrul proiectului

1. PETCU Elena, SCHITEA Maria, BADEA  Domnica,  2006 -  A preliminary method of screening for soil acidity tolerance in Alfalfa, Proc. of Eucarpia Meeting  Medicago Group (Breeding and seed production for conventional and organic agriculture), pag 360-365, Perugia, Italia, 3-7 sep.2006. ISBN-978-88-87652-12-3.

2.  PETCU Elena, SCHITEA Maria, BADEA Domnica, 2006 – The effect of drought on some Romanian alfalfa genotypes, Proc. of Rom. Acad., Series B, 2006, 2-3, PAG. 127-129. ISSN 1454-8267.

3. Paunescu Anca, Hongyan Zhu, Muqiang Gao, Maria Schitea , Elena Badea, 2006 - Breeding of tetraploid Medicago sativa L. using microsatellites markers developed from Medicago truncatula Gaertn. Sequences, Danemarca, Aarhus, la a  “7th European Nitrogen Fixation Conference”.

4. Mihacea S., Boldura O., Schitea M., Badea E., 2007 -  Researches regarding DNA sequence variability for different alfalfa genotypes, Proceeding of the International Conference “ Agricultural and Food Sciences, Process and Technologies, Sibiu, pag. 247-253.

5. Boldura O., Mihacea S, Schitea M., Badea E., The polymorphism identification between mapping population possible parents using RAPD markers, Proceeding of the International Conference “Agricultural and Food Sciences, Process and Technologies, Sibiu, 2007, pag. 59-65.

6. Dragoescu C., Mihacea S., Badea E., Costan A., Nedelea G., Studies concerning the in vitro regeneration capacity among different Romanian alfalfa genotypes, Proceeding of the International Conference “ Agricultural and Food Sciences, Process and Technologies, Sibiu, 2007, pag. 139-143.

7. Boldura O.,  Mihacea S, Schitea M., Badea, Genetic mapping in alfalfa  ( Medicago sativa ) with microsatellites markers, CERCETĂRI STIINŢIFICE , SERIA A XI - A, U.S.A.M.V.B.T., Ed. Agroprint, Timişoara, 2007, pag.479-484.

8. Mihacea S., Badea E., Boldura O., Schitea Maria,, CERCETARI PRIVIND CARTAREA GENETICA LA Medicago sativa, lucrare prezentata laSIMPOZIONUL Realizari in cercetarea stiintifica din biotehnologie obtinute prin Programul CEEX - modulul 1, BIOTECH, Iasi, 30 mai -1 iunie 2007.

9. PÃUNESCU Anca, SCHITEA Maria, BADEA Elena, 2007 –Transfer of Simple Sequence Repeat (SSR) Markers from Medicago truncantula Gaertn to Romanian Tetraploid Medicago sativa L. for germoplasm characterisation and evalution „Biotechnology in agriculture - present challenges and beyond”, USAMV Bucuresti.

 

 CEEX-AGRAL 74

 Denumirea proiectului: Studii avansate privind posibilitatile de prevenire a imbolnavirilor produse de unele specii toxigene de Fusarium sp. in lantul trofic plante furajere-animal-om

 

Sursa de finantare: Bugetul de Stat – Ministerul Educatiei si Cercetarii, Programul ”Cercetare de excelenta”

Autoritatea contractanta:
Universitatea de Stiinte Agronomice si Medicina Veterinara Bucuresti

Contractor:
Institutul National de Cercetare –Dezvoltare Agricola Fundulea

Categoria de proiect: Modulul 1- Proiecte de Cercetare – Dezvoltare Complexe, tipul de proiect P–CD

Valoarea contractului: 1.500.000 lei - din care:

  • de la buget: 1.500.000 lei
  • cofinantare: 0 lei
  • Durata contractului: 2 ani (oct. 2006 – iulie  2008)

Parteneri                      

Coordonator proiect: Institutul National de Cercetare – Dezvoltare Agricola – Fundulea, str. N.Titulescu. nr. 1, 915200, Fundulea , tel. +40213154040, fax. +40242642044, E-mail: tina@ricic.ro, web site: www.incda-fundulea.ro
Director proiect: Dr. Ing. Florentina Raducanu
Partener 1: Institutul de Cercetare Dezvoltare pentru Cresterea Ovinelor si Caprinelor Palas Constanta, Soseaua I.C.Bratianu, nr. 248, 060042, Constanta, Tel/fax:0241548186/0241639506, e-mail: stela@canals.ro, www.icdoc.ro
                              Responsabil stiintific: Dr. Dorina Nadolu
Partener 2: Universitatea Ovidius Constanta,str. B-dul Mamaia,nr.124, tel/fax;024169040/02416639506; e-mail:rectorat@univ-ovidius.ro ; www.univ-ovidius.ro
       Responsabil stiintific: Prof.univ.dr. Stela Zamfirescu

 

Aria tematică : 2.    Alimentatie, agricultura si biotehnologii: 2.2 Alimentatie, sanatate si buna stare; Aspecte ale hranei si alimentatiei din punctul de vedere al consumatorului, al societatii si al protejarii sanatatii, inclusiv legate de stiintele comportamentale si cognitive; tehnologii inovative privind hrana si prelucrarea alimentelor (inclusiv hrana functionala), imbunatatirea calitatii si sigurantei chimice si microbiologice a alimentelor si bauturilor, integritatea lantului alimentar, lantul alimentar total, inclusiv transabilitatea acestuia.

Rezumatul propunerii: Cercetarile care vor fi efectuate in cadrul acestui proiect, urmaresc  in primul rand obtinerea unor mutante rezistente de Triticale (Triticosecale Wittmack) si  lucerna (Medicago sativa L.) fata de patogenii toxigeni Fusarium graminearum si Fusarium oxysporum, prin utilizarea unor metode si tehnici neconventionale. In acest fel, se are in vedere imbunatatirea intr-un timp relativ scurt, a calitatii si sigurantei chimice si microbiologice a furajelor cu implicatii asupra intregului lant alimentar si asupra trasabilitatii acestuia. In paralel, vor fi efectuate studii aprofundate in vederea evidentierii modificarilor produse de toxina patogenului la nivelul profilelor: biochimic, hematologic si ultrastructural la sobolani alimentati cu lapte si carne, alimente provenite de la oi si capre hranite in exclusivitate cu furaje infestate (triticale si lucerna), in vederea producerii de anticorpi monoclonali pentru detectarea infectiilor cu Fusarium sp., la om. Astfel, intr-o prima etapa, vor fi efectuate studii privind unele componenete ale mecanismelor  defensive la genotipuri de triticale si lucerna (prezenta chitinazei in radacinile si tulpinile plantelor infectate in vivo, cu filtrat de F. oxysporum in conditii  controlate de mediu); in scopul determinarii gradului real de rezistenta al genotipurilor  comparativ cu reactia lor fenotipica. Concomitent, se vor efectua lucrari de testare in vederea selectiei genotipurilor in ceea ce priveste pretabilitatea la cultura in vitro. Genotipurile cu raspuns foarte bun (capacitate de calusare si regenerare) caracterizate si prin insusiri agronomice superioare vor fi utilizate atat pentru studiile efectuate in vitro, cat si pentru infiintarea bazei furajere, care sa asigure hranirea  unui esantion de oi si capre, pe tot parcursul experimentului. Genotipurile selectionate vor fi introduse intr-un ciclu riguros de testare si selectie in vitro, in prezenta micotoxinelor deoxynivalenol DON si  acid fusaric (toxinele predominante ale speciilor de Fusarium luate in studiu) in mediile de cultura. Pe parcursul experimentului vor fi efectuate studii aprofundate cu privire la: i) influenta micotoxinei asupra celulelor vegetale testate in vitro in prezenta acidului fusaric (determinari ale continutului in clorofila, a suprafetei foliare, continutul in prolina, studiul izoenzimelor specifice genotipurilor de la care   s-a pornit experimentul si a celor obtinute in vitro sub influenta stresului indus de prezenta in mediile de cultura a micotoxinelor si al filtratelor de cultura). ii) Vor fi elaborate metode paraclinice de stabilire a nivelului toxinelor in ser, determinari ale compozitiei chimice a laptelui si carnii de ovine si caprine hranite cu furaje infestate. Tinand cont de toxicitatea micotoxinelor prezente in filtratele de cultura, aplicarea tratamentelor se va efectua la nivel de ratie zilnica /cap animal furajat, in conditii controlate, in spatii inchise, luindu-se toate masurile de protectie a muncii pentru personalul care va efectua tratamentele. iii) De asemenea, se vor efectua teste de laborator asupra alimentelor, la inceputul, pe parcursul si la finalul cercetarii in vederea inregistrarii cu exactitate a modificarilor biochimice, atat a produselor lactate, la nivelul organismului animalelor furajate, cat si la nivelul animalelor de laborator  hranite cu lapte si derivatele lui si vor fi efectuate studii electronomicroscopice la nivelul unor parametri metabolici implicati in intoxicarea cu micotoxinele studiate. Rezultatele estimate in urma proiectului sunt pe de o parte, obtinerea unor genotipuri de triticale si lucerna intr-un timp relativ scurt cu rezistenta sporita la atacul de Fusarium graminearum si Fusarium oxysporum, care vor asigura obtinerea de furaj de calitate, liber de toxine (plante pentru viitor)  iar pe de alta parte, rezultate stiintifice bine fundamentate privind posibilitatile de izolare a micotoxinelor si de limitare a influentei acestora asupra intregului lant trofic: planta infectata-animal furajat cu furajul infectat-animal hranit (sobolani) cu laptele si derivatele sale provenit de la animalele furajate exclusiv cu furaj infestat. Vor fi elucidate aspecte legate de timpul de metabolizare a acidului fusaric la nivel de planta, produs animalier si organismul animalului de laborator in vederea producerii de anticorpi monoclonali pentru detectarea infectiilor cu Fusarium sp. la om.

OBIECTIVE GENERALE

  1. Inducerea variabilitatii somaclonale prin embriogeneza somatica indirecta la genotipuri de triticale si lucerna  cu insusiri agronomice superioare.
  2. Elaborarea unor metodologii de testare si selectie, cu randament ridicat al capacitatii de regenerare (parametru deficitar la culturile in vitro).
  3. Identificarea unei metode eficiente de obtinere a izolatelor toxigene si a filtratelor de Fusarium sp.
  4. Identificarea modificarilor survenite la plante regenerate pe medii suplimentate cu filtrate de Fusarium sp. si /sau micotoxinele DON si acid fusaric.
  5. Obtinerea de somaclone tolerante/rezistente la Fusarium graminearum si Fusarium oxysporum.
  6. Identificarea modificarilor biochimice, hematologice si ultrastructurale la animalele hranite cu furaje infestate cu Fusarium sp.
  7. Elaborarea unei metode  paraclinice pentru stabilirea nivelului de toxine din ser si lapte.
  8. Identificarea modificarilor produse de micotoxinele patogenului Fusarium sp.asupra compozitiei chimice a produselor animaliere.
  9. Identificarea efectelor micotoxinelor patogenului Fusarium sp. asupra reproductiei.
  10. Elaborarea unui test imunologic pentru diagnosticarea la om a intoxicatiilor produse de micotoxine.

PROBLEME PROPUSE SPRE REZOLVARE
Deoarece, de regula, exista diferente importante intre genotipuri din punct de vedere al cresterii calusului  chiar in absenta factorului de stres, se va urmari identificarea genotipurilor de interes agronomic care sa fie pretabile la aplicarea unor metode de selectie in vitro (capacitate ridicata de calusare si potential embriogenic ridicat). - Se va stabili in ce masura aplicarea agentului selectiv in mediul de cultura evidentiaza diferente in comportarea calusului in vitro, intre genotipuri de triticale si lucerna reprezentative pentru variabilitatea genetica existenta in cadrul germoplasmei de ameliorare la aceste culturi.- Se va  stabili daca variabilitatea existenta din punct de vedere al rezistentei patogenilor Fusarium graminearum si Fusarium oxysporum in germoplasama reprezentativa poate fi evidentiata sau nu la nivel celular, in vitro.- Vor fi  identificate mutante tolerante/rezistente de triticale si lucerna fata de patogenul Fusarium, prin utilizarea embriogenezei somatice si embrioculturii (cea de a doua metoda se va folosi in vederea obtinerii generatiei R1 si a testarii in vivo, in conditii controlate). - Se vor efectua studii cu privire la influenta micotoxinei asupra celulelor vegetale, asupra fecunditatii, starii de gestatie, mortalitatii embrionare si fetale la animale, asupra viabilitatii si greutatii produsilor la animalele hranite cu furaje infestate cu Fusarium sp. - Se vor efectua studii electronomicroscopice, determinari ale unor parametri fiziologici implicati in reactia la stres  a plantelor si animalelor. - Pe baza caracterizarii plantelor obtinute in vitro in prezenta agentului selectiv, a plantelor infestate in vivo cu toxina patogenului si a rezultatelor obtinute pe intregul lant  planta – animal - produse alimentare, vor fi elaborate metode de identificare a toxinelor patogenilor respectivi. - Se va studia timpul de metabolizare a acidului fusaric la nivel de planta, produs animalier, organism, si se va studia posibilitatea producerii de anticorpi monoclonali pentru detectarea infectiilor cu Fusarium oxysporum si Fusarium graminearum.

 REZULTATE / BENEFICII ŞI SCHEMA/ PLANUL DE VALORIFICARE/ DISEMINARE

qq

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



Sus